Soru:
Bir araştırma grubu, nadir bir bitki türünden elde ettikleri değerli bir enzim genini klonlamak istiyor. Bitki DNA'sını izole ettikten sonra aşağıdaki yöntemlerden hangisini kullanmaları daha uygundur ve neden?
- A) Genomik DNA kütüphanesi oluşturma
- B) cDNA kütüphanesi oluşturma
- C) PCR ile doğrudan çoğaltma
Çözüm:
💡 En uygun yöntemin seçilme gerekçesi:
- ➡️ Doğru cevap: B) cDNA kütüphanesi oluşturma
- ➡️ Neden cDNA? Bitki hücrelerinde intronlar bulunur ve bakteriler intronları işleyemez
- ➡️ cDNA avantajı: mRNA'dan reverse transkriptaz ile sentezlendiği için intron içermez
- ➡️ PCR neden uygun değil? Gen dizisi bilinmiyorsa primer tasarlanamaz
- ➡️ Genomik DNA neden uygun değil? İntronlar bakteride eksprese edilemez
✅ cDNA kütüphanesi, ökaryotik genlerin prokaryotik sistemlerde ifade edilmesi için en uygun yöntemdir.
